Ct值计算 | 献给初学者 Q Pcr 计算看这一篇就够了

September 07, 2021

样品组的 Δct 减去空白组的 Δct 均值得到 ΔΔct. 0 477-477 1 POWER2-E2 第二步计算 Ct处理的 Ct-对照的 Ct.

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计算空白组的 Δct 均值.

Ct值计算. Ct 值的含义是每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数 cycle qRT-PCR在扩增的时候都会有平台期在平台期之前PCR 扩增就是简单的指数增长也就是 1 变 22 变 44 变 8扩. 常见人体组织的CT值HU 组织 CT值组织 CT值骨组织 400 肝脏 5070 钙值 80300 脾脏 3560 血块 6484 胰腺 3055 脑白质 2534 肾脏 2550 脑灰质 2844 肌肉 4055 脑脊液 38 胆囊 1030 血液 1332 甲状腺 5090 血浆 314 脂肪 20100 渗出液 15 水 0. 荧光域值threshold的设定一般将 PCR 反应前 15 个循环的荧光信号作为荧光本底信号荧光域值是PCR315 个循环荧光信号标准差的10 倍荧光域值设定在 PCR 扩增的指 CT值表示每个 PCR 反应管内荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数.

在这里要说明下实际上的产物量并一定是2 为底数而是1e的 ct 次方只有扩增效率接近于 1 的时候才可以用 2 为底数关于扩. 荧光定量PCR之后计算目的基因的相对表达量一般采用 2- ct 的方法我们还是假设对照组和处理组各有三个生物学重复即对照组 3 个 cDNA 样品 cDNA1 cDNA2 cDNA3 处理组 3 个 cDNA 样品 cDNA4 cDNA5 cDNA6 三个技术重复即每个 cDNA 的每个基因点三个孔. 步骤⑦ qPCR检测环节用DNA或cDNA样品进行qPCR基因检测检测出来的CT值带入计算出来的标准曲线即DNA的拷贝数对数值就出来了例如y -369x 3637 Y为CT值X为DNA拷贝数对数值即反推X CT值-3637 -369.

CT值的计算公式CT值 Ux-U水在73千电子伏U水在73千电子伏K式中K是一常数其值等于1000. 像素值灰度值转换为CT值 CT值的单位是Hounsfield简称为Hu范围是-1024-3071 用于衡量人体组织对X射线的吸收率设定水的吸收率为0Hu. 我们首先计算第一个 Δct即每组的待检基因减去内参基因的 CT 值.

Ct 值的含义是每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数 cycle qRT-PCR在扩增的时候都会有平台期在平台期之前PCR 扩增就是简单的指数增长也就是 1 变 22 变 44 变 8扩增. 理想情况下Ct值与模板起始拷贝数的对数存在线性关系也就是标准曲线通过标准曲线扩增效率为100 时计算出基因单个拷贝数定量的Ct值在35左右若大于35理论上模板起始拷贝数小于1可认为无意义. 如果 r 2 为 1那么 y 值 ct 可以用来准确预测 x 值图7a如果 r 2 为 0那么就不能通过 y 值预测 x 值图 7br 2 值 099 表示两个数值之间相关的置信度良好精确度.

但是 Ct 值差 1 就代表差了 2 倍的病毒量如果差了 10 就代表是 2 的 10 次方等於 Ct 值 20 與 Ct 值 30 就差了將近 1024 倍而近期爆發的本土確診個案 Ct 值均落在 20-25 左右也代表 Ct 值都偏低傳染力也較高民眾得提高警覺參考資料. 如果需要计算多列数据的CV值怎么操作方便呢很简单鼠标单击选中B10到B12然后把鼠标移至B12的右下角会出现一个小十字此时按住Ctrl键又多了一个小然后往C12D12E12单元格方向拖即可自动求出其他列的CV值查看剩余2张图.

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